一种复方药物在制备预防治疗MAFLD药物中的应用

一种复方药物在制备预防/治疗mafld药物中的应用
技术领域
1.本发明属于中药新用途技术领域，具体涉及一种复方药物在制备预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病药物中的应用。


背景技术：

2.代谢相关性脂肪性肝病(metabolic-dysfunction-associated fatty liver disease, mafld)是由除酒精和其他明确的损肝因素外所致，主要表现为以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变、脂质代谢紊乱和脂质过氧化诱发的炎症为主要特征的临床病理综合征，现已超过病毒性肝炎成为世界范围内的第一大肝病。如不加以控制mafld可进一步发展成非酒精性脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化、肝硬化甚至肝癌等疾病。同时，mafld也是诱发心脑血管疾病、糖尿病、心脏疾病、慢性肾脏病等相关疾病的主要原因之一。近年来，随着人们生活水平的提高及生活方式的改变，mafld疾病的发病率呈现逐年上升且年轻化的趋势。据相关机构2019年统计，mafld在全球的患病人数高达1.9亿人；我国患病率也达到29％。因其发病率高、易发展成其他肝病，mafld已经成为当前全球重要的公共健康问题之一，严重影响了人们的正常生活。因此，mafld的防治具有重要的社会意义和医学研究价值。
3.目前mafld的防治尚缺乏理想的治疗药物。以往mafld的治疗措施主要分为4类：
①
运动疗法，缺点在于难以坚持，且不能完全控制病情的发展；
②
外科治疗(减肥手术和肝脏移植)，缺点在于费用高，复发率高；
③
饮食疗法，缺点在于没有确切的mafld饮食治疗方案，治疗效果在临床实际中并不容易得到重复。
④
药物治疗，缺点在于当前临床上主要使用的药物(为他订类、噻唑烷二酮类)不能根除脂质过氧化诱发的炎症反应，而且这些药物长期服用会出现较大的副作用。因此寻找一种有效、安全的代谢相关性脂肪性肝病的防治药物已成为当务之急。
4.mafld是遗传、环境、代谢、应激相关性疾病，其发病机制较为复杂，至今尚未完全阐明。影响mafld的发病因素并不是独立存在的，而是互为因果、相互促进、相互合作的关系促进mafld的发生发展。因此，随着研究的深入，科学家在“二次打击”学说的基础上提出了malfd可能是“多重平行打击”(氧化应激损伤、肝纤维生成通路及肝星状细胞的激活、脂肪因子的表达改变等)变得敏感，进而引起脂肪性肝炎及纤维化。由此可见，线粒体功能障碍、脂质过氧化以及一些脂肪因子的激活在mafld的发展中起着重要作用。由于mafld的发病是多种信号通路同时异常引起的，靶向单一信号通路的药物难以有效根治，而且容易出现耐药。因此，开发高效低毒的创新药物以调节脂质代谢异常、消除炎症促使肝脏恢复正常功能势在必行。


技术实现要素：

5.本发明目的是针对现有技术对mafld的预防/治疗尚无确切药物的不足，提供一种复方药物在制备预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病药物中的用途，该复方药物具有预防和治疗 mafld、能有效抑制mafld患者糖脂代谢紊乱、改善胰岛素抵抗及减轻脂质过氧化造成
的损伤的作用。
6.为达到上述目的，本发明的技术方案为：
7.一种复方药物在制备预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病药物中的应用，以重量份计，所述复方药物的原料药为银杏叶25-60份、丹参25-60份、灯盏细辛15-40份、绞股蓝15-40 份、山楂20-50份、大蒜20-50份、三七10-30份和艾片5-20份。
8.前述复方药物的应用，以重量份计，所述复方药物的原料药为银杏叶40-60份、丹参40-60 份、灯盏细辛20-40份、绞股蓝20-40份、山楂30-50份、大蒜30-50份、三七15-30份和艾片5-15份。
9.前述复方药物的应用，以重量份计，所述复方药物的原料药为银杏叶50份、丹参50份、灯盏细辛30份、绞股蓝30份、山楂40份、大蒜40份、三七20份和艾片10份。
10.前述复方药物的应用，所述复方药物的制法为：分别取银杏叶、丹参、灯盏细辛、绞股蓝、山楂、大蒜、三七和艾片共八味药材，每次加入八味药材总重量5-15倍的50％-80％乙醇水溶液，于50-80℃温度下回流提取1-4次，每次0.5-3h，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至 40℃-80℃相对密度为1.13-1.30的浸膏，干燥，即得。
11.前述复方药物的应用，所述复方药物的制法为：分别取银杏叶、丹参、灯盏细辛、绞股蓝、山楂、大蒜、三七和艾片共八味药材，每次加入八味药材总重量7-13倍的50％-70％乙醇，回流提取1-3次，每次1-3h，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至40℃-70℃相对密度为1.25-1.30 的浸膏，干燥，即得。
12.前述复方药物的应用，所述复方药物的制法为：分别取银杏叶、丹参、灯盏细辛、绞股蓝、山楂、大蒜、三七和艾片共八味药材，每次加入八味药材总重量10倍的60％乙醇，回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至50℃相对密度为1.13-1.15的浸膏，干燥，即得。
13.将上述得到的浓缩浸膏和药学上可接受的载体制备成口服液、片剂、散剂、颗粒剂、胶囊、丸剂、缓释制剂、控释制剂、靶向制剂、糖浆剂或其他合剂的药物。
14.所述辅料可以为淀粉、环糊精、微粉硅胶羟丙基纤维素钠、蔗糖、聚维酮、硬脂酸镁和香精中的任何一种或多种的混合。
15.本发明所述复方药物中各原料药的功效活性：
16.银杏叶(臣药)：味甘、苦、涩，性平；归心、肺经。具有活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，化浊降脂等功效，可用于治疗瘀血阻络，高血压、动脉硬化，闭塞性脉管炎，心绞痛，脑血栓，高脂血症。
17.丹参(君药)：味苦，性微寒；归心、肝经。具有活血祛瘀，消肿止血，消炎止痛，降低血压，降血糖，安神静心，通经止痛，清心除烦，凉血消痈的功效，用于治疗胸痹心痛，脘腹胁痛，症瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮疡肿痛，肝脾肿大。
18.灯盏细辛(使药)：味辛、微苦，性温。具有活血通络止痛，祛风散寒的功效，用于治疗中风偏瘫，胸痹心痛，风湿痹痛，头痛，牙痛。
19.绞股蓝(佐药)：味苦，性寒。具有清热解毒、止咳清肺祛痰、养心安神、补气生精之功效，可用于降血压、降血脂、护肝、促进睡眠以及肠胃炎、气管炎、咽喉炎的治疗，并用于多种癌症的抗癌临床治疗。
20.山楂(使药)：味酸、甘，性微，归脾、胃、肝经。具有消食健胃，行气散瘀，化浊降脂的
功效，用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，瘀血经闭，产后瘀阻，心腹刺痛，胸痹心痛，疝气疼痛，高脂血症等病症。
21.大蒜(使药)：性温，味辛。归脾经、胃经、肺经。具有行滞气、暖脾胃、消积、消肿、解毒杀虫的功效。属温里药。用于治疗治饮食积滞，脘腹冷痛，水肿胀满，泄泻，痢疾，高血糖症。
22.三七(佐药)：味甘、微苦，性温，归肝、胃经。有散瘀止血、消炎定痛和滋补之功效，用于治疗咯血，吐血，便血，崩漏，外伤出血，胸腹刺痛，跌扑肿痛等症。
23.艾片(使药)：味辛、苦，性微寒，归心、脾、肺经。具有开窍醒神，清热止痛的功效，用于治疗热病神昏、痉厥，中风痰厥，气郁暴厥，中恶昏迷，目赤，口疮，咽喉肿痛，耳道流脓等症。
24.以丹参为君药，以银杏叶为臣药，以绞股蓝、三七为佐药，以灯盏细辛、山楂、大蒜、艾片为使药。
25.相对于现有技术，本发明的有益效果为：
26.本发明公开一种复方药物在制备预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病药物中的应用。本发明所述复方药物来源于贵州民间中医经验方，由丹参、银杏叶、绞股蓝、三七、灯盏细辛、山楂、大蒜、艾片共8味药组成，具有活血化瘀、行气止痛、消食化滞、护肝健脾的功效。方中以丹参为君药起到活血化瘀、健脾祛湿的作用，以银杏叶为臣药起到消肿定痛、护肝降脂的作用，以绞股蓝、三七为佐药，起到清热利湿、疏肝解郁、养心安神的作用，以灯盏细辛、山楂、荷叶、艾片为使药起到消食化滞、清浊解毒、降脂、行气散瘀、促进肠道蠕动的作用。诸药合用协同起效，针对mafld关键环节进行多途径、多靶点调控。通过改善胰岛素抵抗、调整脂质代谢异常和降低炎症因子il-6和tnf-α的含量能有效调控mafld病程的发生发展；同时也克服了西药联合治疗带来费用昂贵和药物不良反应的不足，使用方便，安全有效，为预防/治疗mafld疾病的临床用药提供了新的选择。
附图说明
27.图1为复方药物对小鼠血糖含量的影响；ce：复方药物处理组，ri：罗格列酮处理组， m：mafld模型组；ct：正常组；其中a：小鼠空腹血糖含量测定；b：小鼠葡萄糖耐量测定； ###：m组与ct组相比p《0.001；*：ri组与m组相比p《0.05；**：ce组与m组相比p《0.01；
28.图2为复方药物对小鼠体重及腹部脂肪重量的影响；ce：复方药物处理组，ri：罗格列酮处理组，m：mafld模型组；ct：正常组；其中a：小鼠形态对比；b：小鼠体重分析；c：小鼠腹部脂肪重量分析；
29.图3为小鼠肝组织病理分析；ce：复方药物处理组，ri：罗格列酮处理组，m：mafld 模型组，ct：正常组；其中a:小鼠肝脏h&e染色；b：小鼠肝脏油红o染色；c：小鼠肝脏形态观察；
30.图4为小鼠肝脏切片分析；ce：复方药物处理组，ri：罗格列酮处理组，m：mafld模型组，ct：正常组；其中a、b、c、d：小鼠血清中alt、ast、tg、tc含量测定；
31.图5为elisa测定小鼠血清中il-6和tnf-α的含量；ce：复方药物处理组，ri：罗格列酮处理组，m：mafld模型组，ct：正常组；其中a：小鼠血清中il-6含量；b：小鼠血清中tnf-α含量；
32.图6为复方药物对小鼠血清低密度脂蛋白含量(ldl-c)和高密度脂蛋白含量(hdl-c) 的影响；ce：复方药物处理组，ri：罗格列酮处理组，m：nafldmafld模型组，ct：正常组；
33.图7为小鼠肠道菌群16s测序；ce：复方药物处理组，ri：罗格列酮处理组，m：mafld 模型组，ct：正常组；
34.图8为复方药物对小鼠肝脏代谢通路kegg pathway分析；
35.图9为各组小鼠肝脏脂质代谢相关基因表达量；ce：复方药物处理组，ri：罗格列酮处理组，m：mafld模型组，ct：正常组。
具体实施方式
36.本发明实施例1：复方药物的制备及应用：
37.以重量份计，取银杏叶50份、丹参50份、灯盏细辛30份、绞股蓝30份、山楂40份、大蒜 40份、三七20份和艾片10份，加入10倍重量的60％乙醇，回流提取2h，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至50℃相对密度为1.13-1.15的清膏，再喷雾干燥，装胶囊制成胶囊剂；所得胶囊剂可直接用于预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病。用法用量：口服，一次2-4粒，一日3次。
38.实施例2：复方药物的制备及应用：
39.以重量份计，取银杏叶25份、丹参60份、灯盏细辛15份、绞股蓝15份、山楂20份、大蒜20份、三七10份和艾片20份，加入5倍重量的80％乙醇，回流提取4次，每次0.5h，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至80℃相对密度为1.25-1.30的清膏，再加入适量淀粉和木糖醇，混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂；所得颗粒剂可直接用于预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病。用法用量：口服，一次1-2包(每包0.5g)，一日3次。
40.实施例3：复方药物的应用：
41.取银杏叶40份、丹参50份、灯盏细辛40份、绞股蓝40份、山楂50份、大蒜50份、三七30份和艾片5份。加入15重量倍量50％乙醇，回流提取2次，每次3h，过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩，得浓缩液，备用。将浓缩液加入蒸馏水溶解，加入适量的矫味剂和防腐剂后过滤，调节ph值，制成口服液；所得口服液可直接用于预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病。用法用量：口服，一次3-6ml或1-2瓶(每瓶3ml)，一日2-3次。
42.实施例4：复方药物的应用：
43.取银杏叶60份、丹参25份、灯盏细辛20份、绞股蓝25份、山楂30份、大蒜40份、三七15份和艾片15份。加入7重量倍量70％乙醇，回流提取3次，每次1h，过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩，得浓缩液，备用。将浓缩液加入蒸馏水溶解，加入适量的辅料，制成丸剂；所得丸剂可直接用于预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病。用法用量：口服，一次 0.8-1.6g，一日2次。
44.实施例5：复方药物的应用：
45.取银杏叶45份、丹参35份、灯盏细辛25份、绞股蓝30份、山楂30份、大蒜25份、三七20份和艾片10份。加入13重量倍量60％乙醇，回流提取3次，每次1h，过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩，得浓缩液，备用。将浓缩液加入蒸馏水溶解，加入适量的蔗糖，制成糖浆剂；所得糖浆剂可直接用于预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病。用法用量：口服，一次 8-10g，一日2-3次。
46.实验例：
47.1.实验材料
48.1.1材料及方法
49.spf级c57/6小鼠，雄鼠，6周龄，体重20
±
2g，共50只，均购自南京模式动物研究所。小鼠饲喂生长繁殖饲料和高脂饲料，大鼠饲喂生长繁殖饲料，均由上海华雅思创生物公司生产，饮用水为灭菌自来水，试验期间动物自由采食饮水，实验室温度21
±
2℃，湿度40-70％，实验室许可证号：syxk(黔)2018-0001。
50.1.2仪器
51.台式离心机(beckman)，生物安全柜(thermo scientific)，细胞培养箱(thermoscientific)，荧光倒置显微镜(olympus)，恒温水浴锅(grant)，高压蒸汽灭菌锅(shenan)， milli-q制水机(biogen)，多功能酶标仪(bio tek)，实时定量pcr(bd biosciences)。
52.1.3分组及建立mafld模型
53.动物购进适应一周后，进入实验状态。将50只小鼠，随机分为5组，每组10只，分别为：正常组、模型组、阳性对照组、本发明复方药物组。除正常组给予正常饲料和灭菌自来水外，其余组全部给予高脂饲料，饮用10％果糖水，持续饲喂12周。
54.1.4分组给药
55.实验造模第4周开始灌胃给药。给予本发明实施例2的制剂2.96g生药/kg灌胃给药，阳性药组给予罗格列酮10mg/kg。正常组及模型组灌胃等体积的生理盐水，每日一次，连续给药 8周。给药期间，除正常组外，各组小鼠均继续造模。小鼠每周称一次体重，按体重变化给药量。
56.1.5实验动物处理
57.第12周末，给药结束后动物禁食不禁水12h，称重。各组小鼠以10％水合氯醛麻醉后，脱臼处死小鼠，眼眶取血。将血清放置冰上静置1-2h，3000rpm离心15min，取血清放置
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20℃保存待用。同时取小鼠肝脏、小鼠粪便，冻存于-80℃冰箱中进行后续分析检测。
58.小鼠肠道菌群16s测序：
59.a.用毛叶山桐子果实提取物处理mafld小鼠12周后，脱臼处死小鼠，利用75％酒精对死亡小鼠尸体进行表面消毒。随后用无菌解剖刀，在无菌状态下取出整个肠道，无菌生理盐水清洗肠道外表面后，切取所需肠段(在无菌操作台进行)。
60.b.用无菌手术刀挖取内容物，装入无菌2.0ml离心管中，每管取约50～100mg到无菌的2.0ml离心管中，每个样本取3-5管备份。
61.c.将样本进行液氮速冻后，转移到-80℃冰箱保存。
62.d.将小鼠粪便样品用干冰寄送至中国华大基因公司，委托其对小鼠粪便样品进行16s 测序分析。
63.1.6检测指标
64.1.6.1小鼠空腹血糖及葡萄糖耐受测定
65.小鼠在给药结束之后，禁食不禁水12h后，取小鼠尾静脉血液用罗氏血糖仪检测血糖含量。葡萄糖耐受测定：空腹血糖测定后，腹腔注射葡萄糖(剂量1.5g/kg)，取小鼠尾静脉血液用罗氏血糖仪分别测定腹腔注射葡萄糖不同时间段(0min、15min、30min、60min、 120min)的血糖含量。
66.1.6.2肝脏样品
67.给药结束后取小鼠部分肝脏样品和粪便样品送华大基因做转录组测序分析；给药结束后取小鼠肝脏部分样品和结肠样品送至武汉赛维尔生物科技有限公司，进行肝脏组织病理分析 (h&e染色和油红o染色)。
68.1.6.3酶标仪检测各组小鼠血清样品中谷丙转氨酶(alt)、谷草转氨酶(ast)、甘油三脂(tg)、总胆固醇(tc)含量
69.小鼠血液生化指标的检测，用1.5制备好的小鼠血清样本采用南京检测生物制品有限公司生产的试剂盒通过酶标仪来检测alt、ast、tg、tc等指标含量。
70.1.6.4酶联免疫吸附剂术(elisa)检测各组小鼠血清中il-6、tnf-α含量
71.小鼠血液生化指标的检测，用1.5制备好的小鼠血清样本采用elisa试剂盒通过酶标仪来检测il-6、tnf-α等指标。
72.1.6.5肠道菌群分析
73.肠道菌群16s测序分析，用1.5制备好的小鼠粪便样本送至华大基因做肠道菌群16s测序分析。
74.1.7实时荧光定量pcr检测各组小鼠肝脏中脂质代谢相关基因表达
75.给药结束后，取各组小鼠肝脏(5mg)，按照trizol试剂盒操作提取总rna，根据 primescript
tm rt reagent kit说明书操作反转录cdna，根据实时荧光定量pcr试剂盒操作步骤进行扩增，最后使用2
‑△△
ct
值分析脂质代谢基因fas、cpt-1、srebp-1、scd1、acaca等的表达情况。
76.1.8统计方法
77.实验结果采用spss 22.0统计软件，所有数据采用均数
±
标准差表示，两两比较采用t检验，p《0.05为差异有统计学意义。
78.1.9实验结果
79.1.9.1小鼠空腹血糖及葡萄糖耐受结果
80.实验结果如图1a所示，模型组小鼠空腹血糖(m)含量显著高于正常组(ct)(p《0.001)，而阳性药罗格列酮处理组(ir)和本发明中的复方药物(ce)组小鼠血糖含量均显著低于m 组(p《0.05，p《0.01)。从图1b中我们可发现，将1.5g/kg的葡萄糖通过腹腔注射到小鼠体内15min后，随着时间的增加ir和ce组小鼠血糖含量呈现显著下降的趋势，这说明ir和ce处理后均显著增强了小鼠对葡糖糖的耐受能力。结合上述结果我们发现，ir和ce处理后均降低了小鼠血糖含量，同时增加了小鼠对葡萄糖的耐受能力。另外，值得注意的是，通过对比小鼠空腹血糖含量及葡糖糖耐受结果，我们发现ce处理后对小鼠血糖含量及增加小鼠葡糖糖耐受的结果均优于阳性药ir。
81.1.9.2小鼠体重及脂肪含量变化
82.如图2a和b所示，m组小鼠的体重显著高于ct组(p《0.001)；与m组相比，ce处理显著降低了小鼠的体重(p《0.01)，而ri组小鼠体重与m组无明显差异(p》0.05)。给药结束后通过比较小鼠腹部脂肪重量结果显示(图2c)，相比m组，ri和ce处理显著均降低了小鼠腹部脂肪重量(p《0.05；p《0.001)。上述实验结果还显示，所述复方药物对小鼠体重增长的抑制效果明显优于阳性药罗格列酮。
83.1.9.3小鼠肝脏切片分析
84.h&e染色显示高脂诱导的mafld模型小鼠均有点状坏死及炎细胞浸润出现及不同
程度的脂肪变性及空泡样变，同时mafld模型组小鼠肝脏明显大于ce方剂组及罗格列酮(ri)组(图 3a)，且其肝呈现不同程度的乳白色(图3c)。油红o染色结果显示，高脂诱导的mafld模型小鼠肝脏中脂肪含量明显增加(图3b)。所述方剂(ce)处理后明显改善了小鼠肝脏脂肪变性、空泡样变及脂质蓄积，同时小鼠肝脏形态与正常组趋于一致(图3c)。
85.1.9.4小鼠肝脏切片分析
86.与正常组相比，高脂饮食诱导的mafld组，小鼠alt、ast、tg、tc均显著升高(p《0.05)；所述ce方剂组显著下调了饮食诱导的mafld模型小鼠血清中alt、ast、tg、tc含量(p《0.05)；且ce的作用效果显著优于罗格列酮处理组(图4)。
87.1.9.5酶联免疫吸附剂术(elisa)检测各组小鼠血清中il-6、tnf-α含量
88.给药结束后，通过elisa试剂盒测定小鼠各组血清中il-6和tnf-α的含量。与正常组相比(图5)，高脂饮食诱导的mafld模型小鼠血清中炎症因子il-6和tnf-α的含量显著高于ct 组(p《0.001)；ri组血清中il-6和tnf-α的含量与m组相比无显著变化(p》0.05)；而与m 组相比，ce处理后mafld小鼠血清中il-6和tnf-α的含量显著降低(p《0.01)，抑制了mafld 模型组小鼠体内炎症因子的表达，且作用效果优于阳性药罗格列酮。
89.1.9.6小鼠血清低密度脂蛋白含量(ldl-c)和高密度脂蛋白含量(hdl-c)变化
90.小鼠血清中低密度脂蛋白含量(ldl-c)和高密度脂蛋白含量(hdl-c)的异常变化是脂代谢紊乱最为敏感的指标之一。如图6所示，与正常组相比，所述复方药物处理组ce显著低了小鼠血清中ldl-c含量(p《0.05)，增加了hdl-c含量(p《0.001)，且对小鼠脂代谢异常的抑制效果优于阳性药罗格列酮组(ri)。
91.1.9.7肠道菌群分析
92.近年来研究发现，肠道微生物紊乱与mafld的发生和发展密切相关。肠道菌群紊乱产生的代谢产物脂多糖(lps)通过肠道上皮细胞吸收进入肝脏与脂质过氧化产生的ros一起激活 nf-κb信号通路，诱发炎症反应的发生和发展。与模型组相比，ce组方制剂处理组显著降低了nafld小鼠肠道厚壁菌门的比例，增加了拟杆菌门的比例促使肠道微生态平衡，且对肠道菌群的有益调节作用优于ri组(图7)。
93.1.9.8小鼠肝脏转录组分析
94.小鼠肝脏转录组学数据显示，ce处理组主要调控涉及小鼠能量代谢通路的380个基因(图 8a)，这些基因参与的代谢通路主要由脂肪酸氧化、脂肪酸合成、酮体代谢途径等(图8b)。所述方剂ce主要通过调节小鼠能量代谢通路来改善或治疗mafld。
95.1.9.9小鼠肝脏脂代谢基因表达量分析
96.小鼠肝脏转录组学数据显示(图9)，高脂饮食显著上调了脂质合成相关基因的表达量 (p《0.05)，所述复方药物组(ce)均显著下调了脂质合成基因fasn、elovl6、scd1、acaca 的表达量(p《0.01)，且ce对上述脂质合成基因表达的抑制效果显著优于阳性组ri。
97.上述动物实验研究结果显示，本发明所述复方药物可通过调节脂质代谢和炎症反应异常信号通路及抑制肠道微生态紊乱进而达到治疗mafld小鼠的目的。为进一步揭示本发明所述复方药物对人mafld细胞模型中脂质蓄积的影响，实验通过本发明所述复方药物大鼠含药血清处理人mafld肝细胞模型，分析其对人mafld肝细胞模型中脂质代谢的影响。如图8所示，本发明所述复方药物含药血清处理组显著降低mafld细胞中脂质蓄积，同时降低了培养液中 tg和tc含量。

技术特征：
1.一种复方药物在制备预防/治疗代谢相关性脂肪性肝病药物中的应用，以重量份计，所述复方药物的原料药为银杏叶25-60份、丹参25-60份、灯盏细辛15-40份、绞股蓝15-40份、山楂20-50份、大蒜20-50份、三七10-30份和艾片5-20份。2.根据权利要求1所述复方药物的应用，其特征在于：以重量份计，所述复方药物的原料药为银杏叶40-60份、丹参40-60份、灯盏细辛20-40份、绞股蓝20-40份、山楂30-50份、大蒜30-50份、三七15-30份和艾片5-15份。3.根据权利要求2所述复方药物的应用，其特征在于：以重量份计，所述复方药物的原料药为银杏叶50份、丹参50份、灯盏细辛30份、绞股蓝30份、山楂40份、大蒜40份、三七20份和艾片10份。4.根据权利要求1-3任一项所述复方药物的应用，其特征在于，所述复方药物的制法为：分别取银杏叶、丹参、灯盏细辛、绞股蓝、山楂、大蒜、三七和艾片共八味药材，每次加入八味药材总重量5-15倍的50％-80％乙醇水溶液，于50-80℃温度下回流提取1-4次，每次0.5-3h，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至40℃-80℃相对密度为1.13-1.30的浸膏，干燥，即得。5.根据权利要求4所述复方药物的应用，其特征在于，所述复方药物的制法为：分别取银杏叶、丹参、灯盏细辛、绞股蓝、山楂、大蒜、三七和艾片共八味药材，每次加入八味药材总重量7-13倍的50％-70％乙醇，回流提取1-3次，每次1-3h，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至40℃-70℃相对密度为1.25-1.30的浸膏，干燥，即得。6.根据权利要求5所述复方药物的应用，其特征在于，所述复方药物的制法为：分别取银杏叶、丹参、灯盏细辛、绞股蓝、山楂、大蒜、三七和艾片共八味药材，每次加入八味药材总重量10倍的60％乙醇，回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至50℃相对密度为1.13-1.15的浸膏，干燥，即得。

技术总结
本发明公开了一种复方药物在制备预防/治疗MAFLD药物中的应用，复方药物以银杏叶、丹参、灯盏细辛、绞股蓝、山楂、大蒜、三七和艾片为原料药制成。该复方药物以丹参为君药起活血化瘀作用，以银杏叶为臣药起护肝降脂作用，以绞股蓝、三七为佐药起养心安神作用，以灯盏细辛、山楂、荷叶、艾片为使药起清浊解毒、促进肠道蠕动的作用；可针对MAFLD关键环节进行多途径、多靶点调控，通过改善胰岛素抵抗、调整脂质代谢异常和降低炎症因子IL-6和TNF-α的含量有效调控MAFLD病程的发生发展；同时也克服了西药联合治疗带来费用昂贵和药物不良反应的不足，使用方便，安全有效，为预防/治疗MAFLD疾病的临床用药提供了新选择。临床用药提供了新选择。临床用药提供了新选择。


技术研发人员：黄磊 李艳梅 胡安玲 饶青 宋晶睿 黄裕兵 王琨 吴小森 李静
受保护的技术使用者：贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室(贵州医科大学天然产物化学重点实验室）
技术研发日：2021.11.26
技术公布日：2022/5/25